γ射线照射后小鼠骨髓造血细胞凋亡及Fas表达的研究

目的：研究γ射线照射后小鼠骨髓造血细胞凋亡及其与Fas 表达的关系。方法：采用电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术观察小鼠经60Co γ射线照射后不同时间的骨髓造血细胞凋亡及Fas的表达情况。结果：在照射后4 h细胞即出现核固缩、染色质凝集;DNA琼脂糖凝胶电泳有大量的小分子片段,呈典型“梯状”图谱;流式细胞术分析表明,凋亡细胞百分率在照射后4 h明显增加,8 h达到高峰;照后4 h,Fas表达显著增强。结论：γ射线照射后可引起骨髓造血细胞凋亡,Fas可能参与了辐射诱导的造血细胞凋亡过程。     

骨髓细胞-80℃保存及其程序移植的实验研究

目的：提供简便有效的骨髓细胞(BMC)保存方法,以便进一步提高骨髓移植效果。方法：以昆明种小鼠急性放射病为模型,进行了-80℃冷冻保存BMC及其程序移植的研究。结果：-80℃保存的BMC其有核细胞回收率为(89.0±3.5)％,锥虫蓝拒染率为(85.0±3.6)％;产率(每105个BMC)：单核巨噬细胞克隆形成单位(CFU-GM)为108±10,脾细胞克隆形成单位(CFU-S)为12±3。昆明种小鼠程序移植-80℃保存的同种异基因BMC 4×105,其活存率与一次移植同条件冻存的BMC 1×107相同(30％);程序移植4×106时,活存率显著提高(60％)。经性染色体检查各组均有植入证据。结论：-80℃保存BMC是一种行之有效的方法;骨髓程序移植可能充分利用了每次腾出的“龛位”,减少了移植细胞数,却增加了干细胞植入,提高了移植效果,是一种“种子与土壤”并重的移植新方法。     

加强放射医学科研思维教学的实践和体会

放射医学旨在培养适应我国社会主义现代化建设实际需要的,德智体美全面发展的,具有创新精神和系统放射医学理论知识与实际能力,能从事放射医学及防护、放射性病诊治、核医学及医学影像等工作的高级专门人才。它是医学的重要组成部分,也是现代医学的一门重要课程。然而放射医学实验室因为教学班次多,学员数量大,授课任务重,教学实验室和师资紧张等因素,往年虽然能够圆满完成教学工作,但实验室在科研思维和SCI论文发表教学上却一直成果不多。近两年实验室大力加强放射医学科研思维教学的实践,SCI论文数质量已破实验室记录。     

利用蛋白质组学技术筛选辐射致癌相关蛋白质

背景与目的:辐射致癌的机制目前尚不明确.本研究通过建立辐射致癌的细胞模型,应用蛋白质组学技术观察辐射癌变细胞和正常细胞间的差异蛋白表达谱,以期获得辐射致癌相关蛋白.方法:选取永生化的人支气管上皮细胞株(BEAS-2B),利用γ射线照射诱导癌变,建立辐射致癌的细胞模型.利用二维凝胶电泳技术,筛选癌变细胞和正常细胞间的差异表达蛋白点并进行质谱鉴定分析.通过Western blot技术对其中4个蛋白:ENO1、Prx I、Dyrk2和GPX1在辐射致癌不同阶段的表达情况进行分析.结果:在辐射癌变细胞和正常细胞间共得到可信差异表达蛋白点59个.其中14个仅在癌变细胞中表达,15个仅在正常细胞中表达,23个在癌变细胞中表达降低,7个在癌变细胞中表达升高.通过质谱分析,共有26个蛋白点得到鉴定,主要包括一些参与细胞代谢、增殖、分化的酶类、信号调控蛋白、DNA结合蛋白以及一些细胞结构蛋白和少数功能不明的蛋白及肽段.其中ENO1和Prx I随辐射癌变的进展而升高,Dyrk2和GPX1随辐射癌变的进展而降低.结论:应用二维电泳技术可获得辐射致癌差异表达蛋白谱,筛选和鉴定出与辐射致癌相关的差异表达蛋白,并可检测部分差异蛋白在辐射致癌不同阶段的表达情况.     

表达人源VEGF-A小鼠模型的建立及抗VEGF抗体研究

血管内皮生长因子-A(VEGF-A)是一种蛋白质,在血管生成和肿瘤发生中具有关键作用。人源化抗VEGF-A单克隆抗体Bevacizumab(美国Genentech公司的抗癌药,商品名Avastin)已获得美国食品和药品管理局(FDA)的批准上市用于一线药物结合化学疗法治疗转移性结直肠癌和非鳞状上皮细胞、非小细胞起源的肺癌。试验表明,肿瘤和基质细胞产生的VEGF-A在免疫缺陷小鼠中可以促进人类移植瘤的血管生成,这一作用可以被抗VEGF抗体所封闭。尽管体外实验表明,VEGF-A和抗体之间的亲和力可以表现为阻断VEGF刺激内皮细胞增殖的速度,但在大多数动物模型中…     

辐射诱导旁效应研究进展

随着人们对低剂量辐射后发生的间接和延迟效应(如突变、基因不稳定性)的重视，以及新的高效工具(如单细胞微束和先进的培养系统)的应用，过去的十几年对辐射诱导旁效应的产生机制有了许多新的认识和发现。辐射诱导旁效应是受基因调控，由细胞问信号传递途径中介产生的。     

~(125)I标记抗Flt4多抗的制备及对淋巴结定位的动物实验

目的　研究氯胺T法标记兔抗鼠血管内皮生长因子受体 3的多克隆抗体 (Flt4PcAb) ,以此探索Flt4PcAb对体内淋巴结的导向定位能力 ,旨在为前哨淋巴结 (sentinellymphnode,SLN)的特异性定位提供实验依据。方法　应用氯胺T法对Flt4PcAb行12 5I标记 ,对标记产物行性质鉴定并进行大鼠体内导向定位实验。结果　标记率为 39.5 % ,标记产物比活度为 1.75MBq/μg ,放化纯度为 95 .4 % ;标记产物性质稳定 ,无热源 ;动物实验显示淋巴结与血液及各脏器单位重量的放射性比值较高。结论　Flt4PcAb具有良好的淋巴结的导向定位能力 ,是探索SLN准确定位的新途径。     

弱酸性艳红B辐射脱色剂量学效应

目的观察弱酸性艳红B溶液的辐射脱色剂量学效应.方法配制不同浓度的弱酸性艳红B溶液,以γ射线进行0～2000Gy的梯度剂量照射,分别用计算机色度分析技术测定、记录其三基色色度值变化,进行数据处理、绘图分析,并确定实验浓度,继续观察实验样本受温度和时间变化的影响.结果随着试剂浓度及照射剂量的变化,三基色色度值出现明显的规律性变化,其中红色和绿色色度值旱明确的此消彼长关系,蓝色色度变化小明显.室温环境存放4周的样本实验数据无明显差异.结论将弱酸性艳红B溶液的变色现象与计算机色度分析技术结合可开展新的辐射剂量学研究,该领域尚有很大的完善发展空间.     

FHIT基因转染增强人肝癌细胞HepG2辐射敏感性

目的探讨脆性组胺酸三联体基因转染对肿瘤细胞辐射敏感性的影响。方法首先构建了含有FHIT基因编码序列的真核表达质粒pcDNA／FHIT，并转染人肝癌细胞株Hep G2得到表达正常FHIT蛋白的细胞株Hep G2，FHIT。然后利用CCK-8和流式细胞仪等方法研究了Hep G2／FHIT细胞接受^60Coγ射线电离辐射后细胞周期、增殖和凋亡的改变。结果研究表明人肝癌细胞Hep G2重新表达FHIT后其对电离辐射的敏感性增加，表现为接受电离辐射后细胞存活率下降，凋亡细胞增加。细胞周期检测发现Hep G2重新表达FHIT后接受电离辐射后发生G2期阻滞的程度减轻。结论FHIT基因缺失的肿瘤细胞重新表达正常的FHIT蛋白可以提高其辐射敏感性，并且辐射敏感性提高可能是和FHIT基因抑制了ATR／CHK1通路活性有关。FHIT基因．电离辐射联合治疗肿瘤，具有一定的协同作用，可以作为一个较好的肿瘤基因治疗的靶点。     

反义STAT3寡核苷酸对B16细胞辐射敏感性的研究

目的 探讨反义STAT3转染鼠恶性黑色素瘤B16细胞后,肿瘤细胞辐射敏感性的变化。方法 利用反义寡核苷酸转染B16细胞后,以不同剂量γ射线照射。通过CCK-8试剂盒检测细胞增殖变化,Hoechst33258染色对细胞凋亡作形态学上的观察。用Annexin V/PI复染,流式细胞仪检测细胞早期凋亡率的变化。结果 反义STAT3转染后加以γ射线照射,B16细胞的增殖相比于两者单独作用组受到明显抑制,细胞凋亡水平也增加。结论 反义STAT3寡核苷酸联合γ射线对B16细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用明显增强,提高了鼠黑色素瘤B16细胞的辐射敏感性;表明阻断STAT3蛋白表达可能成为一种新的提高肿瘤辐射敏感性的有效手段。